微生物笔记--微生物培养的基本过程 |
信息来源:泰安大同不凡生物工程有限公司 发布时间:2024/4/4 8:27:25 浏览量:59 次 |
微生物培养在微生物实验室中是一项关键的技术,微生物培养结果的好坏对微生物研究工作至关重要。微生物培养的基本过程如下:
1.准备培养基
培养基含有微生物所需的营养物质,包括碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子和水。合适的培养基能够为微生物的生长提供一个适宜的生存环境,以获得生长良好的菌株。因此,在准备培养基前,应当考虑目的菌株的生长需求,选择合适的培养基。
选择培养基一般有四个基本原则:
目的明确:明确拟培养何种微生物;明确培养的微生物是用于实验室研究还是用于生产;明确微生物的生长特性等等目的;
营养协调:根据微生物的生长特性确定合适的碳氮比,一般来说,细菌的碳氮比低,真菌的碳氮比高。
理化适宜:培养基的pH、渗透压和水活度等理化环境应当适宜,即在配制培养基过程中,需要调节培养基的pH、渗透压和水活度等,如:在最适pH方面,细菌是6.5-7.5,霉菌是4.0-5.8,放线菌是7.5-8.5,酵母菌是3.8-6.0,藻类是6.0-7.0,原生动物为6.0-8.0,部分嗜极菌的对pH要求更高。
成本问题:此部分主要涉及生产过程,显而易见,选择合适且成本低的培养基能够收获更多的经济效益。
培养基根据不同物理形态可以分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基和脱水培养基,也可以根据功能不同分为选择性培养基和鉴定性培养基。
因此,准备培养基需要综合考虑微生物的生长特性及培养目的选择合适的培养基。
2.物料灭菌
培养基准备完成后,需要按照其特性进行灭菌处理,同时准备其他实验物料,进行灭菌工作。此步骤是防止在后续培养微生物过程中引入其它微生物,造成杂菌污染的情况。
3.接菌
此步骤需要掌握无菌操作的技术,将目的菌株进行接种的过程,如菌种的复苏,以平板划线法将保藏的菌株在无菌操作下完成接种的过程。
4.微生物培养
完成微生物接种后,将目的菌株放置于合适培养环境中进行培养,其环境包括:是否需氧、温度、湿度、二氧化碳含量等条件的设置,如温度:细菌一般设置为30-40℃,放线菌30℃,酵母菌25-37℃,霉菌30℃。
5.观察与记录
微生物培养后,需要对微生物的生长情况进行观察和记录,包括菌落的形态、大小、颜色以及数目等,其生长情况关乎着后续的实验。
6.收获与保藏
在培养基中生长到一定程度的微生物可用来后续的实验研究、生产和保藏,根据不同的目的对其进行处理。
7.微生物检测
培养得到的微生物,可以对其进行检测,包括:微生物鉴定、药敏试验测试和代谢产物检测等等,此步骤是验证培养的微生物是否符合目的要求。
8.微生物灭菌
当微生物完成相应检测、生产和实验研究后,需要对微生物进行灭菌处理,此步骤是为了防止微生物的污染。
综上所述,可以知道,微生物培养的基本操作如下:
配制培养基:选择合适的培养基后,计算和称量所需用量,将培养基溶解,分装至合适的容器,然后包装;
物料灭菌:将配制好的培养基与实验所需的物料进行灭菌处理;
接菌:无菌操作完成接菌过程;
培养:在适宜培养条件下进行微生物的培养过程;
检测与保藏:对培养得到的微生物作相关检测或将微生物保藏;
废弃微生物的处理:对完成研究或生长的微生物进行灭菌处理。
以上是微生物培养的基本过程和操作,更加具体的培养过程需要依据不同的微生物进行调整。
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